隨著用于醫學和研究目的的大-麻合法化程度的提高,對其活性成分進行準確,高通量分析的需求急劇增加。
最重要的兩個是具有治療用途的精神活性THC和止痛CBD。 THC和CBD的比例對于區分藥用大-麻和休閑大-麻至關重要。這個比例對稅務部門,醫療監管者和種植者都非常重要。
THC / CBD比率的確定
準確測定THC / CBD的比例至關重要,這是通過對大-麻葉,芽和花的樣品進行有效的樣品制備來確定的。傳統的樣品制備方法已使用拍打或研磨機將這些材料均質化。當在聚丙烯微孔板中進行操作時,這些機器施加的極-端壓力通常會損壞孔板,從而導致破裂,滲漏并最終導致交叉污染。分析的目的是確定總THC。
這包括無羧酸鹽形式(THCA)以及熱轉化形式THC。醫學價值是CBD含量的函數,CBD含量必須再次總計才能包括天然羧酸形式。
高效液相色譜(HPLC)可以在將THCA和CBD的酸成分轉化為相應的游離形式的THC和CBD之前鑒定它們的酸成分,因此首-選mouth劑和大-麻產品。
氣相色譜(GC)分析的一個缺點是熱注射器中THCA和TBDA的破壞,這可能會使THC / TBD比的最終數據不準確。因此,HPLC / UV或LC / MS應該是首-選的分析方法。以下方法也可用于制劑和植物原料。
儀器與方法
• Porvair Sciences 2ml深孔種子基因組微孔板219030
• Porvair Sciences 96孔蓋墊219004
• Porvair Sciences Microlute真空歧管228008
• Porvair Sciences Microlute P3板240100
• 具有96孔螺旋針頭的Porvair Sciences Minivap蒸發器(229206&229072)
• 具有3板適配器的Porvair Sciences Microshake微板振蕩器(229651和229654)
• Porvair Sciences 2.2毫升方形深孔板(219009)
• 實驗室研磨機(例如Spex GenoGrinder)
對于THC / CBD比率分析,應隨機取樣大-麻葉,芽和花的樣品(如果有)。我們建議在Porvair 229030植物基因組板的每個孔中準確稱量約50mg的干燥植物材料。
將3 x 3mm的鋼或鎳研磨球(如果研磨種子材料,則需要鎳)添加到植物基因組板中。
用219004蓋墊密封板,然后將蓋好的板放入GenoGrinder中。
在1500 rpm下研磨2分鐘。取下蓋墊,將干燥的地面粉末(應通過1毫米篩子)轉移到Porvair P3過濾微孔板(240100)的每個孔中。
準確添加400ul甲醇或異丙醇(根據需要)以溶解植物材料中的油性殘留物。
在Porvair Microshake搖床(229651)上用P3板適配器(229654)或其他合適的搖床以330 rpm的速度攪拌10分鐘。
P3板中的超疏水玻璃料將防止泄漏,但為使您更加省心,可以使用可選的排水蓋墊,如果需要,應在測定開始之前將其置于板的底面(219005)。
搖晃后,取下排液蓋,將P3板放置在Porvair Microlute歧管(228008)上,該歧管在氣室中具有2ml的收集板。該收集板可以是另一個種子基因組板(219030)或標準的2ml方孔板(219009)。任何SLAS / ANSI格式的深孔板均可用于收集步驟,但是219009和219030使用的是無萃取聚丙烯,不會對要分析的溶液產生滲濾液。
此外,其板的幾何形狀已針對Porvair Microlute歧管進行了優化,因此無需進一步調整即可防止孔之間的交叉污染。抽真空以將純化的提取液向下抽吸通過過濾器并進入收集板的孔中。使用歧管上的閥隔離真空源,并使用針形閥釋放增壓室中的真空?,F在可以丟棄濾板,可以將含有有機提取物的收集板帶入HPLC進行分析。
如果首-選分析總THC和CBD,則需要執行額外的步驟。在這種情況下,必須通過加熱將THCA和CBDA轉化為THC和CBD。
取2ml含有溶劑提取物的收集板,將其放在Porvair Minivap上。將溫度設置為最-高(60℃)并蒸發至干,繼續用熱氣加熱45分鐘,以使熱不穩定的THCA和CBDA解離為THC和CBD。冷卻至室溫后,將其重新懸浮在400ul的溶劑中,在微搖瓶上搖晃硅藻土以確保充分混合,然后進行HPLC分析。
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